一、药厂设计之凝胶过滤层析
凝胶过滤是基于分子大小不同而进行分离的一种层析技术,一般情况下,均指液相柱层析。其通用的名称还有凝胶渗透层析、分子筛层析、排阻层析等。
如果保证柱床高度、线性流速及原料浓度不变,凝胶过滤层析工艺可平稳地由小量试验放大至中试及大生产规模。目前已有大至2500L柱床的凝胶过滤层析工艺应用于大规模生产之中凝胶过滤层析的关键在介质或填料的选择上,应从分离目的和需分离的物质分子大小两方面进行综合考虑。
为将原料中的目的组分按预期目标分离出来,并达到要求的产量和分离效率,需要对分辨率、层析时间、进料量等方面因素做综合考虑,全面设计凝胶过滤工艺方法。要达到足够的分辨率并不困难,设计重点可放在提高纯化的效率方面,如怎样获得最大回收率,怎样使收集的组分稀释程度降至最低,还有如何使层析时间缩至最短等
二、药厂设计之反相层析和疏水作用层析
反相层析和疏水作用层析都是基于物质分子的疏水基团与层析介质上的疏水基团相互作用在非极性的固定相和极性的流动相之间重新分配而得以分离的技术。两者的基本差别主要在于介质功能基团疏水性的强弱程度不同,反映在疏水侧链的长度及其在介质骨架上的密集程度两个方面。疏水性强的称为反相层析,而较弱的则称为疏水作用层析。
在疏水作用层析和反相层析中,当不同疏水性的目的分子吸附到介质上之后,主要通过降低盐浓度或增加流动相的极性来减少目的分子与介质之间的疏水作用达到解吸和洗脱的目的。由于不同目的分子疏水性不同,因而与介质之间的作用强度也就不同,因此在梯度洗脱时便可相互分离。